Genelight 核酸染料     

概述

    Genelight是本公司開發的(de)新型聚次甲基類核酸染料，與市場(chǎng)上最好的(de)核酸染料gelgreen類似，具有安全、高(gāo)靈敏度、高(gāo)穩定性等突出特點，可(kě)以作爲各種核酸電泳的(de)染色劑，可(kě)完美(měi)替代EB及SYBR 系列核酸染料以及高(gāo)毒性的(de)吖啶橙染料。Genelight最大(dà)吸收峰爲500nm左右，另外，在紫外

區(qū)200nm—300nm還(hái)有一個(gè)吸收峰。兼容254 nm的(de)紫外透射或可(kě)見光(guāng)激發的(de)凝膠成像儀，如Dark Reader或488 nm凝膠激光(guāng)掃描儀。

特點
      安全、低毒：Genelight由于獨特的(de)相對(duì)疏水(shuǐ)性和(hé)大(dà)分(fēn)子量，不能輕易穿透人(rén)體細胞膜，引發緻癌，艾姆斯氏試驗結果也(yě)表明(míng)，該類染料的(de)誘變

性遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于EB。請注意，所有核酸染料均不能保證完全無毒，相對(duì)的(de)安全性來(lái)自于染料能否輕易的(de)進入細胞。Genelight的(de)安全性來(lái)自于其分(fēn)子量較大(dà)和(hé)相對(duì)疏水(shuǐ)性，不能輕易進入細胞，以及染料與核酸通(tōng)過靜電方式結合而不是嵌入DNA，所以不易引起突變。

靈敏度高(gāo)：核酸檢測的(de)靈敏度平均高(gāo)于EB染色法10倍左右。适用(yòng)于各種大(dà)小片段的(de)電泳染色，對(duì)核酸遷移的(de)影(yǐng)響小于SYBR Green I。

      請注意：市面上存在著(zhe)多(duō)種gelgreen類似的(de)産品，質量不盡相同，主要區(qū)别在于最終的(de)結構是否合适以及濃度和(hé)純度是否足夠。超純的(de)Genelight保證了(le)DNA 條帶清晰且靈敏度高(gāo)（見下(xià)圖）。條帶清晰的(de)DNA帶便于檢測或者分(fēn)離和(hé)回收DNA片段。

圖1. 1%的(de)Agarose gel。Lane 1、3、5: DL2000 DNA marker; lane2、4、6：λ-EcoT14Ⅰdigest DNA marker。

圖中明(míng)顯看出Genelight跑出的(de)片段條帶清晰且窄

      穩定性高(gāo)：使用(yòng)微波或其它加熱(rè)方法制備瓊脂糖凝膠時(shí)，不影(yǐng)響染料的(de)穩定性；室溫下(xià)在酸或堿緩沖液中極其穩定，耐光(guāng)性強。

由于Genelight具有良好的(de)熱(rè)穩定性，可(kě)以在熱(rè)的(de)瓊脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷(lěng)卻。搖晃，振蕩或者翻轉以保證染料充分(fēn)混勻。也(yě)可(kě)以選擇将Genelight儲液加到瓊脂糖粉末和(hé)電泳緩沖液中，然後用(yòng)微波爐或其他(tā)常用(yòng)方式加熱(rè)以制備瓊脂糖凝膠。Genelight兼容所有常用(yòng)的(de)電泳緩沖溶液。

      信噪比高(gāo)：樣品熒光(guāng)信号強，背景信号低。不像某些劇毒的(de)冒牌産品有明(míng)顯的(de)背景信号，如EB或者吖啶橙（熒光(guāng)信号低且有劇毒）。

圖2. 1%的(de)Agarose gel。Lane 1、3: DL2000 DNA marker; lane2、4：λ-EcoT14ⅠdigestDNA marker。
圖中可(kě)以看出假冒産品明(míng)顯背景極高(gāo)，極有可(kě)能爲EB

      操作簡單：具有多(duō)種使用(yòng)方法。與EB一樣，在預制膠和(hé)電泳過程中染料不降解，可(kě)直接電泳時(shí)染色；若電泳後染色，也(yě)隻需30分(fēn)鐘(zhōng)且無需脫色或沖洗
      适用(yòng)範圍廣：可(kě)适用(yòng)于多(duō)種電泳分(fēn)析。可(kě)選擇電泳前染色（膠染法）或電泳後染色（泡染法）；适用(yòng)于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳；可(kě)用(yòng)于dsDNA、ssDNA或 RNA 染色。
      兼容性高(gāo)：與标準凝膠成像系統以及可(kě)見光(guāng)激發的(de)凝膠觀察裝置完美(měi)兼容。适用(yòng)于使用(yòng) 254nm 激發的(de)紫外凝膠成像系統或藍色可(kě)見光(guāng)激發的(de)凝膠觀察裝置。推薦使用(yòng)藍色可(kě)見光(guāng)激發的(de)凝膠觀察裝置，效果最佳。
價格經濟：價格遠(yuǎn)低于進口同類産品。

使用(yòng)方法
      方法一：直接電泳染色法
      1. 制膠: 按常規操作，制備瓊脂糖凝膠，凝膠熔化(huà)後，加入10000×Genelight染料，使染料在凝膠中的(de)終濃度爲1×，（例如制備50ml凝膠，加入染料5ul）。輕輕搖勻，倒膠。
      2. 電泳、觀測：按常規方法電泳，觀測。
     提示：對(duì)于1KB以上的(de)Marker建議(yì)20000×Genelight減少一半用(yòng)量。如果條帶有拖尾現象，也(yě)請減半用(yòng)量。

     方法二：電泳後染方法：本方法适合于各種凝膠分(fēn)析。
      1. 按照(zhào)常規方法進行電泳。
      2. 用(yòng)PH 7.0 — 8.5 的(de)緩沖液（如：TAE，TBE 或 TE），按照(zhào)30000：1的(de)比例進行Genelight染料的(de)稀釋，混勻，制成染色溶液，。
      3. 将染色溶液倒入合适的(de)聚丙烯容器中，放入凝膠，用(yòng)鋁箔等蓋住容器避光(guāng)。室溫振蕩染色10—45分(fēn)鐘(zhōng)。染色時(shí)間因凝膠濃度和(hé)厚度而定。凝膠越厚、濃度越高(gāo)，所需染色時(shí)間越長(cháng)。對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠，可(kě)以直接在玻璃平皿上染色（玻璃平皿必須預先經過矽烷化(huà)溶液處理(lǐ)，避免染料吸附在玻璃表面上），将配好的(de)工作溶液輕輕地倒在膠闆上，均勻地覆蓋整個(gè)膠闆，并染色10—30分(fēn)鐘(zhōng)。
      4. 觀測。

質保聲明(míng)
       Genelight核酸染料經過嚴格的(de)質控檢測，确保該産品具有最高(gāo)的(de)安全、純度與穩定性。請使用(yòng)前務必仔細閱讀本手冊。

注意事項及其他(tā)特點
      1. 加入Genelight的(de)凝膠可(kě)反複熔化(huà)使用(yòng)，但檢測靈敏度會降低。
      2. Genelight對(duì)玻璃和(hé)非聚丙烯材料具有一定親合力。建議(yì)使用(yòng)聚丙烯類容器進行稀釋、貯存、染色等操作。
      3. 在常規用(yòng)酒精沉澱核酸的(de)過程中，Genelight可(kě)以全部從雙鏈核酸上去掉。
      4. 具有兼容性：對(duì)分(fēn)子生物(wù)學中常用(yòng)的(de)酶（如：Taq酶、内切酶、T4連接酶等）沒有抑制作用(yòng)。

使用(yòng)限制：

       本試劑僅限用(yòng)于科學研究。

儲存與安全：

       本品常溫運輸，儲存于室溫，避光(guāng)，有效期至少一年。