肝纖維化(huà)動物(wù)模型
建模方法:
1. CCL4 誘導肝纖維化(huà)動物(wù)模型
按5ml/kg 體重皮下(xià)注射體積分(fēn)數爲20% CCl4的(de)油劑溶液(CCl4:橄榄油=1:4), 每3天1次,連續6W。對(duì)照(zhào)組動物(wù)皮下(xià)注射等量等次的(de)橄榄油溶劑。正常飲食飼養,觀察動物(wù)活動、精神狀況和(hé)飲食量,實驗前後稱量小鼠體重。
2. 二甲基亞硝胺(DMN)誘導肝纖維化(huà)動物(wù)模型
按10mg/kg體重的(de)劑量腹腔注射1%DMN生理(lǐ)鹽水(shuǐ)稀釋液,1次/d,2次/周,連續4周。造模期間,每日觀察動物(wù)的(de)一般情況,每周稱重一次。
3. 乙醇誘導肝纖維化(huà)動物(wù)模型
灌胃給乙醇5g/kg體重,每日晨1次,連續24周。或灌胃給乙醇-玉米油-吡唑混合液,每日晨1次,連續12周。混合液中各組分(fēn)攝入量比例分(fēn)别爲:每日乙醇6~10g/kg體重,玉米油2g/kg體重,吡唑24mg/kg體重,另外間斷給予高(gāo)脂飼料。其中,乙醇攝入量是随時(shí)間的(de)延長(cháng)而逐步遞增的(de)。造模過程中,每日觀察動物(wù)一般狀況及體重的(de)經時(shí)變化(huà)。
模型評價
1. 大(dà)體觀察: 實驗組小鼠随著(zhe)給藥時(shí)間延長(cháng)活動逐漸減少, 精神萎糜,毛發蓬亂無光(guāng)澤;大(dà)體标本顯示,實驗組肝髒與周圍組織粘連明(míng)顯,肝邊緣圓頓,肝髒表面和(hé)切面呈彌漫的(de)細小結節。
2.肝髒指數變化(huà):取肝髒,稱質量,計算(suàn)肝髒指數=肝髒重/體重, 實驗組小鼠肝髒顯著高(gāo)于對(duì)照(zhào)組小鼠。
3.肝功能指标:
檢測小鼠血清中肝功能指标:丙氨酸轉氨酶(ALT)、天冬氨酸轉氨酶(AST)、總膽紅素(TBL)、白蛋白(ALB)。結果發現 實驗組小鼠血清中ALT、AST、TBL的(de)含量顯著高(gāo)于對(duì)照(zhào)組,ALB的(de)含量顯著低于對(duì)照(zhào)組。
組織病理(lǐ)學
取肝左葉,體積分(fēn)數爲10%福爾馬林(lín)固定,石蠟包埋切片,經HE及 Masson 染色後在電鏡下(xià)觀察肝髒炎症及肝纖維化(huà)程度。