急性肺損傷動物(wù)模型
建模方法
将小鼠放入固定盒中，用(yòng)酒精檫拭小鼠尾靜脈後，按壓住尾靜脈1/3處，注射器進針後回抽有血後注入LPS溶液（溶于生理(lǐ)鹽水(shuǐ)，給藥劑量10mg/kg），從而建立内毒素性急性肺損傷小鼠模型。正常對(duì)照(zhào)組的(de)小鼠做(zuò)同樣的(de)操作，但向尾靜脈注射等體積的(de)生理(lǐ)鹽水(shuǐ)。
模型評價
1.肺損傷後的(de)大(dà)體觀察：
肺損傷後有肉眼可(kě)見肺部大(dà)面積出血滲出，可(kě)以直觀的(de)反映肺損傷程度。
2.肺的(de)濕/幹重比：
肺的(de)濕/幹重比是反應肺水(shuǐ)腫的(de)直接指标，也(yě)是反應肺損傷嚴重程度的(de)敏感指标。建模後，大(dà)量液體滲出至肺泡和(hé)肺間質，導緻肺的(de)重量增大(dà)，而肺的(de)幹重則不受影(yǐng)響。處死小鼠、剪斷氣管後取全肺，稱濕重，然後将肺置于65℃恒溫箱中幹燥，24h 後取出稱幹重，計算(suàn)肺濕/幹重比值。
組織病理(lǐ)學
取左肺4%多(duō)聚甲醛固定，然後将肺組織常規脫水(shuǐ)，石蠟包埋，切片（厚度爲5μm），HE染色。HE染色肺組織學評價可(kě)以直觀的(de)反應肺損傷的(de)程度，ALI組織病理(lǐ)學主要表現爲肺泡中性粒細胞及紅細胞的(de)滲出，肺泡壁透明(míng)膜的(de)形成。HE染色後可(kě)在低倍鏡下(xià)觀察到整個(gè)左肺組織的(de)炎症細胞浸潤、水(shuǐ)腫以及損傷，評估肺部損傷分(fēn)布情況；而高(gāo)倍鏡下(xià)則可(kě)以對(duì)肺泡結構進行辨認，對(duì)肺損傷程度進行評估和(hé)評分(fēn)。
評分(fēn)方法：取6個(gè)視野進行出血及水(shuǐ)腫評分(fēn)。
0分(fēn)：沒有損傷
1分(fēn)：<25%的(de)損傷面積
2分(fēn)：25%~50%的(de)損傷面積
3分(fēn)：50%~75%的(de)損傷面積
4分(fēn)：>75%的(de)損傷面積
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