急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)動物(wù)模型
模型建立：
經腹腔麻醉小鼠，采用(yòng)暴露式氣管切開滴注的(de)方法，經氣管向肺内滴注LPS（給藥劑量6mg/kg）而後将小鼠直立，垂直旋轉小鼠，使藥物(wù)在肺内均勻分(fēn)布，從而建立内毒素性急性肺損傷小鼠模型。或者LPS經尾靜脈或者腹腔給藥，從而建立全身性炎性反應導緻的(de)ARDS模型。
在氣道滴注LPS 6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)及48小時(shí)後，各取3隻小鼠處死并收集支氣管肺泡灌洗液（BALF）及肺組織。
樣本收集：
支氣管肺泡灌洗液（BALF）抽取方法：小鼠取血後，開胸，分(fēn)離縱膈，注射器抽取3ml生理(lǐ)鹽水(shuǐ)從氣管插管推入肺中，每次反複灌洗3次後抽出灌洗液，肺泡灌洗液以4℃ 3000r/min離心15min，取上清。
小鼠肺組織收集：肺組織的(de)獲取及處理(lǐ):經腹腔内注射麻醉小鼠，用(yòng)肝素化(huà)的(de)生理(lǐ)鹽水(shuǐ)1ml經右心室心腔沖洗做(zuò)抗凝處理(lǐ)，即刻從胸腔中取不同部分(fēn)肺組織标本。
模型評價
Diff-Quik 染色和(hé)細胞計數：
獲得(de)BALF進行Diff-Quik染色後，顯微鏡下(xià)觀察計數計數中性粒細胞、巨噬細胞和(hé)淋巴細胞。
肺的(de)濕/幹重比：
肺的(de)濕/幹重比是反應肺水(shuǐ)腫的(de)直接指标，也(yě)是反應肺損傷嚴重程度的(de)敏感指标。每組處死動物(wù)、剪斷氣管後取全肺，稱濕重，然後将肺置于65℃恒溫箱中幹燥，24h 後取出稱幹重，計算(suàn)肺濕/幹重比值。
伊文氏藍測定肺通(tōng)透性：
在實驗結束前30min靜脈注射伊文氏藍（EBD），30mg/kg，實驗結束後，開胸剪開右房(fáng)，沖洗肺循環，完整取出雙肺，剪去氣管，清洗擦幹肺組織，稱重後勻漿，以每100mg肺組織1ml的(de)甲酰胺浸泡肺勻漿，37度下(xià)孵育24小時(shí)，5000r/min離心，取上清測EBD濃度。
組織病理(lǐ)學
肺損傷後的(de)組織病理(lǐ)觀察（HE染色） ：
取右肺4%多(duō)聚甲醛固定，然後将肺組織常規脫水(shuǐ)，石蠟包埋，切片（厚度爲5μm），HE染色。評分(fēn)方法：取6個(gè)視野進行出血及水(shuǐ)腫評分(fēn)。
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