過敏性支氣管哮喘小鼠（OVA誘導）
建模方法
1.明(míng)礬緻敏佐劑：10%明(míng)礬溶液（溶于雙蒸水(shuǐ)）2ml與500ug/ml OVA（溶于PBS）2ml等量混合後，用(yòng)NAOH調PH值爲6.5，室溫孵育60min，750r/min，離心5min，去掉上清液，重溶于2ml PBS。緻敏時(shí)每隻小鼠腹腔注射200ul，其中含2mg明(míng)礬和(hé)100ug OVA。
2.緻敏：小鼠分(fēn)别于第0、14天時(shí)腹腔注射明(míng)礬緻敏佐劑0.2ml，對(duì)照(zhào)組注射相同劑量的(de)PBS溶液，正常飲食飼養。
3.激發：霧化(huà)吸入，第21天時(shí)小鼠放入有機玻璃箱，5% OVA霧化(huà)吸入。每天30min，共7d，最後一次緻敏後24h内檢測。以小鼠出現煩躁不安、呼吸急促、腹肌痙攣等陽性反應作爲造模成功的(de)标準。對(duì)照(zhào)組采用(yòng)PBS霧化(huà)吸入，其他(tā)操作均相同。
4.末次激發24h麻醉小鼠，摘眼球取血，室溫靜置2h後于4℃3000r離心10分(fēn)鐘(zhōng)提取血清，放入-80冰箱凍存。取左肺組織于4%多(duō)聚甲醛溶液中固定用(yòng)于病理(lǐ)染色；右肺組織液氮冷(lěng)凍，-80℃保存用(yòng)于分(fēn)生标本。
模型評價
1.一般觀察 哮喘模型組小鼠在激發開始後出現打噴嚏、點頭呼吸、呼吸急促、哮鳴音(yīn)、腹肌收縮、煩躁等典型哮喘發作症狀，并且後期觀察中發現飲食減少、毛色無光(guāng)澤、行動遲緩及體重逐漸下(xià)降。
2.支氣管肺泡灌洗液(BALF)的(de)收集最後1次激發24 h後(第28天)将各組小鼠頸椎脫臼處死，無菌條件下(xià)分(fēn)離氣管，結紮左主支氣管後,剪開右主支氣管插入氣管導管并固定，無菌生理(lǐ)鹽水(shuǐ)灌洗3次，1mL/次，收集的(de)BALF于4℃，1200 R/min離心5 min，棄去上清液，PBS重懸細胞沉澱并塗片
，進行細胞分(fēn)類。
應用(yòng)
用(yòng)于研究哮喘的(de)發病機制，研發治療和(hé)預防哮喘的(de)藥物(wù)
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