長(cháng)骨缺損動物(wù)模型
長(cháng)骨缺損是由創傷、腫瘤(骨腫瘤手術切除後骨缺損狀況)、感染、骨不連、再骨折、先天畸形、異體骨移植吸收以及其他(tā)由醫源性、繼發性損傷引起的(de)四肢長(cháng)骨的(de)兩折段端端間骨丢失,且該骨丢失可(kě)導緻骨與關節甚至周圍軟組織等發生繼發性病理(lǐ)生理(lǐ)改變,繼而遺留肢體的(de)器質性或功
能性障礙等,這(zhè)種由于骨丢失引發的(de)長(cháng)骨骨缺損疾患常被稱作四肢長(cháng)骨骨缺損。
造模方法:靜脈注射3%戊巴比妥鈉麻醉。麻醉成功後将後退膝關節稍屈曲,繃緊皮膚,脫毛,2.5%碘酒消毒。術區(qū)碘酊、乙醇消毒,鋪無菌巾。避開皮下(xià)血管,斜行切開皮膚、皮下(xià)組織及筋膜,暴露股骨外上髁,剝離附著(zhe)肌腱,暴露股骨幹與股骨髁幹骺線。手持式直徑6mm牙科裂
鑽将鑽入深度1.0mm~2.0mm左右,去除骨質,一并去除缺損處骨膜。

模型評價:
1. micro-CT檢測
取動物(wù)的(de)股骨組織,分(fēn)析骨密度、骨小梁參數,觀察修複效果。
2. 大(dà)體觀察
取材後大(dà)體評價應包括以下(xià)内容:
a. 缺損部位的(de)外觀描述;
b. 缺損周邊骨的(de)外觀(如是否存在骨痂);
c. 周圍骨的(de)外觀(如是否存在骨贅);
d. 修複部位的(de)組織顔色和(hé)數量的(de)描述(包括表面外觀和(hé)結構)。
3.組織病理(lǐ)學
切取骨缺損區(qū)組織作爲标本,10%福爾馬林(lín)或4%甲醛常溫固定3d,标本按照(zhào)脫水(shuǐ)、包埋、硬組織切片後進行組織學觀察:
HE染色、masson染色,觀察成骨細胞、骨小梁、血管形成及膠原纖維生成情況。
4.标志因子水(shuǐ)平
取骨缺損區(qū)域中新生的(de)組織标本,液氮下(xià)撚碎,提取總蛋白。
用(yòng)Western印迹檢測各組織标本中堿性磷酸酶(ALP)、Runx2、Osteoclacin等的(de)表達情況。