皮膚光(guāng)老化(huà)動物(wù)模型（UVB誘導）

建模方法

小鼠在正常溫度、濕度和(hé)光(guāng)照(zhào)（12小時(shí)光(guāng)照(zhào)/ 12小時(shí)黑(hēi)暗，無紫外線照(zhào)射）喂養。喂養一周，等小鼠适應了(le)環境，用(yòng)8%硫化(huà)鈉在小鼠的(de)背部剃出超過2厘米x3厘米的(de)脫毛區(qū)。

紫外照(zhào)射方法： UVB燈管（40W）安放至福照(zhào)箱中作爲紫外福照(zhào)光(guāng)源。利用(yòng)紫外照(zhào)度儀（UV-B紫外輻照(zhào)計）測定UVB的(de)輻射強度。造模前，UV燈管預熱(rè)10 min，待光(guāng)源穩定後将實驗鼠放入自制的(de)鼠籠内（使小鼠間不能相互攀爬、站立），并放入箱照(zhào)箱内，鼠籠與UV燈管相距30 cm，根據預試所得(de)最小紅斑劑量（MED）及光(guāng)源強度調節福照(zhào)時(shí)間，照(zhào)射期間用(yòng)排氣扇降低箱體溫度。第1周按1個(gè)MED的(de)劑量進行照(zhào)射，每周照(zhào)射3次，往後每周照(zhào)射劑量比前周遞增1個(gè)MED，直至第4周4個(gè)MED爲止，之後保持4個(gè)MED直至第8周實驗結束。模型組小鼠背部皮膚出現明(míng)顯增厚、皺紋粗深、松弛等光(guāng)老化(huà)皮膚表征，說明(míng)小鼠皮膚光(guāng)老化(huà)造模成功。

MED測定方法：對(duì)預實驗小鼠分(fēn)别采用(yòng)30mJ/cm2、60mJ/cm2、90mJ/cm2、120mJ/cm2、150mJ/cm2、180mJ/cm2的(de)紫外福照(zhào)劑量對(duì)其背部皮膚進行輻照(zhào)，照(zhào)射後24h觀察小鼠背部皮膚出現肉眼可(kě)見紅斑所需劑量爲最小紅斑劑量(MED)。

模型評價

1.全鼠背部拍(pāi)照(zhào)
　　于第4周以及第8周取樣前，拍(pāi)攝全鼠背部照(zhào)片，以确定是否出現光(guāng)老化(huà)特征（皺紋粗深、松弛等）。
2. 免疫指标： 脾髒和(hé)胸腺指标的(de)測定
　　小鼠稱重并執行頸椎脫位，并立即從小鼠中取出脾髒和(hé)胸腺，立即稱重。胸腺和(hé)脾髒指數根據下(xià)述方程
　　計算(suàn)：胸腺或脾髒指數（mg/g）＝胸腺或脾髒重量/體重。
　　指數（TI）和(hé)脾指數（SI）可(kě)作爲免疫指标。

3.組織學分(fēn)析

在最終紫外照(zhào)射後的(de)24h内取皮膚标本進行組織化(huà)學研究。小鼠皮膚樣品在4%緩沖中性福爾馬林(lín)溶液中固定24h，并嵌入石蠟中，連續切片。