曠場(chǎng)實驗

動物(wù)行爲學實驗是研究人(rén)類發病機制、評價動物(wù)模型造模效果和(hé)新藥效果的(de)一種重要實驗手段，在生命科學、醫學、藥學、軍事醫學和(hé)心理(lǐ)學等領域中被廣泛應用(yòng)。動物(wù)行爲學實驗可(kě)以科學客觀地評價動物(wù)的(de)溝通(tōng)行爲、社交行爲、學習(xí)行爲和(hé)探索行爲等，它可(kě)以幫助科研人(rén)員(yuán)探索認知、情緒和(hé)運動等複雜(zá)的(de)生命現象。

曠場(chǎng)實驗因其操作簡單，所得(de)數據量豐富，一次實驗就可(kě)以對(duì)動物(wù)的(de)自發活動、探索行爲及焦慮、抑郁狀态進行定量評價，在藥物(wù)的(de)研發與開發中得(de)到廣泛的(de)應用(yòng)。它不僅貫穿于小動物(wù)行爲學研究中，并推廣到神經學與精神藥理(lǐ)學研究中，例如用(yòng)來(lái)檢測藥物(wù)的(de)副作用(yòng)（如對(duì)行動的(de)影(yǐng)響、睡(shuì)眠等）。

實驗原理(lǐ)：

曠場(chǎng)實驗（open field test，OFT）也(yě)叫敞箱實驗，可(kě)以檢測實驗動物(wù)自發活動行爲（loco-motor activity）和(hé)探索行爲（exploratory behavior），是評價實驗動物(wù)在新異環境中自主行爲、探究行爲與緊張度的(de)一種方法。例如動物(wù)對(duì)新開闊環境的(de)恐懼而主要在周邊區(qū)域活動，在中央區(qū)域活動較少，但動物(wù)的(de)探究特性又促使其産生在中央區(qū)域活動的(de)動機。

實驗儀器：

實驗裝置由曠場(chǎng)反應箱和(hé)數據自動采集和(hé)處理(lǐ)系統兩部分(fēn)組成。

實驗箱一般是一個(gè)方形的(de)箱子，其中：

大(dà)鼠實驗箱規格（長(cháng)*寬*高(gāo)）：100cm*100cm*40cm；

小鼠實驗箱規格（長(cháng)*寬*高(gāo)）：50cm*50cm*40cm。

圖1 小鼠曠場(chǎng)反應箱示意圖

實驗方法

1、    實驗在安靜的(de)環境下(xià)進行。

2、    實驗開始之前，先确認實驗箱是清潔，無味道的(de)，尤其要注意清理(lǐ)實驗箱底部上一次實驗測試動物(wù)遺留下(xià)來(lái)的(de)糞便、尿液等。

3、    實驗人(rén)員(yuán)在軟件中設置好相應的(de)參數，記錄好動物(wù)的(de)編号、日期、狀态等信息；

4、    将實驗動物(wù)從飼養籠中輕輕取出，注意背向實驗者；

5、    将實驗動物(wù)迅速放置于實驗箱的(de)中央區(qū)域，并立即離開；

6、    打開動物(wù)行爲學分(fēn)析軟件，自動記錄動物(wù)在箱體内的(de)活動，觀察時(shí)間可(kě)根據實驗拟定，通(tōng)常爲15分(fēn)鐘(zhōng)；

7、    實驗結束後，将實驗動物(wù)放入事先準備好的(de)其他(tā)飼養籠内。

8、    用(yòng)酒精噴灑儀器裝置除味，并用(yòng)紙巾擦幹。

觀察指标

區(qū)域的(de)劃分(fēn)：區(qū)域通(tōng)常分(fēn)爲四角、四周及中央區(qū)域，軟件自動統計這(zhè)些區(qū)域内實驗動物(wù)的(de)活動路程、滞留時(shí)間及進入次數、平均速度等。主要觀察指标如下(xià)：

1、水(shuǐ)平運動總距離――――反應實驗動物(wù)的(de)運動情況。例如抑郁動物(wù)水(shuǐ)平運動距離将大(dà)大(dà)減少，多(duō)躲避于曠場(chǎng)一角不動。

2、中央區(qū)運進入總次數――――反應實驗動物(wù)的(de)焦慮情況。抗焦慮藥物(wù)可(kě)以在不改變一般運動情況的(de)前提下(xià)增加實驗動物(wù)的(de)中央區(qū)進入次數。抑郁動物(wù)中央區(qū)進入次數也(yě)會大(dà)幅度下(xià)降。

3、中央區(qū)運滞留時(shí)間――――反應實驗動物(wù)的(de)焦慮情況。抗焦慮藥物(wù)可(kě)以在不改變一般運動情況的(de)前提下(xià)增加實驗動物(wù)的(de)中央區(qū)滞留時(shí)間。抑郁動物(wù)中央區(qū)滞留時(shí)間也(yě)會大(dà)幅度下(xià)降。

4、直立次數――――反應實驗動物(wù)垂直水(shuǐ)平活動情況，主要反應實驗動物(wù)的(de)探究行爲。抑郁動物(wù)對(duì)外界環境的(de)好奇性或探究興趣下(xià)降，所以表現出直立次數顯著下(xià)降。

圖2 運動軌迹圖

注意事項：

1、實驗前需要提前至少3小時(shí)将動物(wù)帶入實驗室，降低動物(wù)對(duì)新環境的(de)不安情緒。

2、實驗動物(wù)的(de)性别、周齡盡量保持一緻，因爲激素水(shuǐ)平可(kě)能會影(yǐng)響動物(wù)行爲。

3、注意實驗動物(wù)的(de)晝夜節律，盡量選擇同一時(shí)間段開展實驗。

4、OFT實驗對(duì)動物(wù)各方面影(yǐng)響較小，而其他(tā)行爲學實驗（如強迫遊泳、水(shuǐ)迷宮、懸尾實驗）影(yǐng)響較大(dà)，因此同一批動物(wù)進行不同行爲學測試時(shí)，應先進行OFT實驗。

5、兩次實驗之間清洗實驗設備，以免上次動物(wù)餘留信息影(yǐng)響下(xià)次實驗結果。