懸尾實驗

懸尾實驗（Tail suspension test, TST）是一種經典而又能快(kuài)速評價抗抑郁藥物(wù)、興奮藥物(wù)、鎮靜藥物(wù)藥效的(de)方法。其原理(lǐ)是利用(yòng)小鼠懸尾後企圖逃脫但又無法逃脫，從而放棄掙紮，進入特有的(de)抑郁不動狀态，實驗過程中記錄動物(wù)不動時(shí)間來(lái)反映抑郁狀态，抗抑郁藥物(wù)、興奮藥物(wù)能明(míng)顯地縮短改變其狀态。

實驗步驟：

1、實驗開始之前，先确認實驗箱是清潔，無味道的(de)，尤其要注意清理(lǐ)實驗箱底部上一次實驗測試動物(wù)遺留下(xià)來(lái)的(de)糞便、尿液等。

2、實驗人(rén)員(yuán)在軟件中設置好相應的(de)參數，記錄好動物(wù)的(de)編号、日期、狀态等信息；

3、将實驗動物(wù)從飼養籠中輕輕取出，剪出長(cháng) 17cm 絕緣膠帶（寬 1～1.5cm），從一端 2cm 處做(zuò)标記。這(zhè)個(gè) 2cm 的(de)部分(fēn)用(yòng)于将膠帶連接到尾部，而剩餘的(de) 15cm 用(yòng)于懸挂小鼠； 膠帶應貼在尾部的(de)尾端，尾部留 2-3mm 的(de)距離；

4、将膠帶貼在懸挂杆上，使小鼠腹部面向攝像頭（便于捕捉四肢的(de)運動情況），并立 即離開；

5、同時(shí)打開動物(wù)行爲學分(fēn)析軟件，自動記錄動物(wù)在空中的(de)活動，實驗時(shí)間通(tōng)常爲6分(fēn)鐘(zhōng)；

6、實驗結束後，應輕輕将膠帶從尾巴上拉下(xià)來(lái)，将實驗動物(wù)放入事先準備好的(de)其他(tā)飼 養籠内。

圖1 懸尾實驗裝置示意圖

結果分(fēn)析：

記錄前 2min 内第一次出現不動的(de)時(shí)間和(hé)後 4min 内累計不動的(de)時(shí)間。 前 2min 内出現不動時(shí)間越早，說明(míng)動物(wù)越容易誘導出抑郁；後 4min 内不動時(shí)間越長(cháng)， 說明(míng)動物(wù)抑郁傾向。

注意事項：

1、不建議(yì)用(yòng)較重的(de)大(dà)鼠，因爲大(dà)鼠隻能通(tōng)過它們的(de)尾巴來(lái)支持它們的(de)體重，這(zhè)對(duì)大(dà)鼠來(lái)說是痛苦的(de)。同樣的(de)道理(lǐ)，應該注意避免使用(yòng)異常重的(de)小鼠（例如用(yòng)于模拟肥胖的(de)小鼠）， 在這(zhè)種情況下(xià)，實驗者應該尋找替代性的(de)測試，例如強迫遊泳實驗。

 2、懸挂用(yòng)的(de)膠帶應牢固地粘貼在小鼠尾部和(hé)懸挂杆上，并且足夠堅固以承受正在測試的(de)小鼠的(de)重量。但是，膠帶不應該過于粘滞。

3、尾巴攀爬阻止器，小鼠在實驗過程，會出現追求和(hé)攀爬它們自己的(de)尾巴的(de)現象，這(zhè) 是個(gè)普遍的(de)問題。解決方法很簡單，而且非常有效：将一段塑料管切成 4 cm 長(cháng)中空圓柱體 （内徑 1.3 cm 左右，1.5 g）放置在小鼠尾巴周圍就能防止這(zhè)種尾巴爬行行爲。注意的(de)是， 在沒有使用(yòng)阻止器之前，已經成功爬上尾巴的(de)小鼠知道逃生是可(kě)能的(de)。因此應将這(zhè)類小鼠排 除。

4、使用(yòng)軟件分(fēn)析時(shí)，選擇最佳對(duì)比度的(de)背景：白鼠使用(yòng)黑(hēi)色背景，黑(hēi)鼠使用(yòng)白色背景

5、動物(wù)懸挂在隔間中間，寬度和(hé)深度足夠大(dà)，不能與牆壁接觸。

 6、實驗環境要求安靜，保證隔音(yīn)，環境噪聲控制在 60dB 以下(xià)。

7、實驗環境需要弱光(guāng)照(zhào)明(míng)，照(zhào)明(míng)度控制在 100Lux 以下(xià)。

8、實驗開始前，将動物(wù)放在實驗室 0.5～3h，降低動物(wù)對(duì)新環境的(de)不安情緒。

9、實驗前需要操作者對(duì)實驗動物(wù)每天撫摸 1～2min 以減少非特異性應激刺激對(duì)實驗動物(wù)檢測中的(de)影(yǐng)響。

 10、實驗動物(wù)的(de)性别、周齡盡量保持一緻，因爲激素水(shuǐ)平可(kě)能會影(yǐng)響動物(wù)行爲。

11、注意實驗動物(wù)的(de)晝夜節律，盡量選擇同一時(shí)間段開展實驗，一般爲每天正常光(guāng)周期 的(de)開燈後 1 小時(shí)開始檢測。

12、數據分(fēn)析可(kě)以通(tōng)過軟件來(lái)進行，如果沒有條件，也(yě)可(kě)以通(tōng)過人(rén)工計時(shí)的(de)方法。小鼠6分(fēn)鐘(zhōng)的(de)實驗數據，隻分(fēn)析後面4分(fēn)鐘(zhōng)的(de)測試數據。